Inmovilización de una β-xilosidasa de Geobacillus stearothermophilus como CLEAs
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Aranda Carrillo, IreneFecha
2022Resumen
Se purificó una β-xilosidasa de la familia 52 de Geobacillus stearothermophilus (XynB2WT) y su
mutante Y509E (XynB2Y509E) con actividad dual de β-xilosidasa y xilanasa con el fin de preparar
agregados enzimáticos entrecruzados (CLEAs). Se utilizó sulfato de amonio (78%) como agente
precipitante y glutaraldehído (25 mM) como agente de reticulación. La reacción de reticulación se llevó
a cabo durante 30 minutos a temperatura ambiente y en agitación horizontal. En estas condiciones,
los CLEAs producidos para XynB2WT y para XynB2Y509E presentaron un 46% y un 34% de actividad
recuperada. La caracterización morfológica realizada a los CLEAs por Microscopía Electrónica de
Barrido puso en evidencia una mezcla homogénea de agregados de pequeño tamaño. La
caracterización bioquímica de enzimas libres e inmovilizadas demostró que el pH y la temperatura
óptimos de reacción eran mayores en XynB2WT libre que en su forma inmovilizada (pH 6,5 frente a 5
y temperatura de 75 °C frente a 65 °C)....
Palabra/s clave
Inmovilización
β-xilosidasa
Geobacillus
Stearothermophilus
CLEAs